Κυνήγι και λαθροθηρία: Αν και οι πάνθηρες της Φλόριντα προστατεύονται βάσει του νόμου περί απειλούμενων ειδών, εξακολουθούν να αντιμετωπίζουν την απειλή του παράνομου κυνηγιού και της λαθροθηρίας. Μερικοί άνθρωποι σκοτώνουν πάνθηρες για τη γούνα τους ή ως αντίποινα για αντιληπτές απειλές για τα ζώα.
Ασθένεια: Οι πάνθηρες της Φλόριντα είναι επιρρεπείς σε διάφορες ασθένειες, συμπεριλαμβανομένης της λευχαιμίας των αιλουροειδών, του AIDS των αιλουροειδών και της ασθένειας του σκύλου. Αυτές οι ασθένειες μπορούν να μεταδοθούν από οικόσιτες γάτες και σκύλους στους πάνθηρες και μπορεί να προκαλέσουν σοβαρά προβλήματα υγείας, ακόμη και θάνατο.
Inbreeding: Λόγω του μικρού πληθυσμού των πάνθηρων της Φλόριντα, η ενδογαμία αποτελεί σημαντική απειλή για τη γενετική τους ποικιλότητα. Η ενδογαμία μπορεί να οδηγήσει σε μειωμένη αναπαραγωγική επιτυχία, αυξημένη ευαισθησία σε ασθένειες και γενικά μειωμένη γενετική ικανότητα.
Συγκρούσεις οχημάτων: Οι πάνθηρες της Φλόριντα συχνά διασχίζουν δρόμους και αυτοκινητόδρομους αναζητώντας τροφή και έδαφος, γεγονός που τους καθιστά ευάλωτους σε συγκρούσεις με οχήματα. Αυτές οι συγκρούσεις μπορεί να προκαλέσουν σοβαρούς τραυματισμούς ή θάνατο στους πάνθηρες.
Παράνομο εμπόριο: Οι πάνθηρες της Φλόριντα μερικές φορές συλλαμβάνονται και πωλούνται παράνομα ως εξωτικά κατοικίδια ή για χρήση σε τσίρκο και άλλους χώρους διασκέδασης. Αυτό το εμπόριο αποτελεί σοβαρή απειλή για την επιβίωση του είδους.