1. Λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης:Τα Gram-αρνητικά βακτήρια, συμπεριλαμβανομένης της σαλμονέλας, έχουν ένα σχετικά λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης στα κυτταρικά τους τοιχώματα σε σύγκριση με θετικά με Gram βακτήρια. Η πεπτιδογλυκάνη είναι ένα πολυμερές που μοιάζει με πλέγμα που συμβάλλει στη δύναμη και την ακαμψία του κυτταρικού τοιχώματος.
2. Εξωτερική μεμβράνη:Gram-αρνητικά βακτήρια, συμπεριλαμβανομένης της σαλμονέλας, διαθέτουν εξωτερική μεμβράνη εκτός από την κυτταροπλασματική μεμβράνη. Η εξωτερική μεμβράνη είναι ένα μοναδικό χαρακτηριστικό που διακρίνει τα Gram-αρνητικά βακτήρια από βακτηρίδια θετικών Gram.
3. Λιποπολυσακχαρίτη (LPS):Η εξωτερική μεμβράνη της σαλμονέλας περιέχει μόρια λιποπολυσακχαρίτη (LPS). Το LPS είναι ένα σύνθετο μόριο που αποτελείται από λιπίδια και πολυσακχαρίτες. Το λιπιδικό τμήμα του LPS, γνωστό ως λιπίδιο Α, είναι υπεύθυνο για τις ενδοτοξικές ιδιότητες των Gram-αρνητικών βακτηρίων.
Η χρώση Gram περιλαμβάνει τα ακόλουθα βήματα:
1. Κρυσταλλική βιολετική χρώση:Όλα τα βακτηρίδια χρωματίζονται με κρυστάλλινα ιώδη χρωστική, η οποία εισέρχεται τόσο σε Gram-θετικά όσο και Gram-αρνητικά βακτηριακά κύτταρα.
2. Λύση ιωδίου Gram:Η λύση ιωδίου Gram προστίθεται ως μονάδα, το οποίο βοηθά στη σταθεροποίηση του συμπλέγματος κρυσταλλικού ιώδους-ιωδίου εντός των βακτηριακών κυττάρων.
3. Βήμα αποχρωματισμού:Τα χρωματισμένα κύτταρα στη συνέχεια υποβάλλονται σε αγωγή με παράγοντα αποχρωματισμού αλκοόλ-ακετόνης. Τα θετικά με Gram βακτήρια διατηρούν το συγκρότημα κρυσταλλικής ιώδεις-ιωδίου, ενώ τα αρνητικά με Gram βακτήρια χάνουν τη βαφή.
4. Αντίσταση Safranin:Τέλος, τα αποχρωματισμένα Gram-αρνητικά βακτήρια αντισταθμίζονται με σαρφρανίνη, η οποία προσδίδει ροζ ή κόκκινο χρώμα σε αυτά.
Μετά την ολοκλήρωση αυτών των βημάτων, τα θετικά με Gram βακτήρια εμφανίζονται μοβ κάτω από το μικροσκόπιο λόγω διατηρούμενου κρυσταλλικού ιώδους, ενώ τα Gram-αρνητικά βακτήρια, συμπεριλαμβανομένης της σαλμονέλας, εμφανίζονται ροζ ή κόκκινο λόγω του αντεπικράκτη σαρφρανίνης.
Συνολικά, η Salmonella είναι αρνητική Gram λόγω της λεπτής στρώσης πεπτιδογλυκάνης, η παρουσία μιας εξωτερικής μεμβράνης με λιποπολυσακχαρίτες (LPS) και η αρνητική του αντίδραση στη διαδικασία χρώσης Gram, με αποτέλεσμα ένα ροζ ή κόκκινο χρωματισμό.