* Nicodemus: Ο σοφός, ηλικιωμένος ηγέτης των αρουραίων.
* Jonathan: Ο γιος του Νικόδημου, ένας νέος και φιλόδοξος αρουραίος που συχνά αμφισβητεί την ηγεσία του πατέρα του.
* MRS. Brisby: Ο κύριος χαρακτήρας της ιστορίας, ένα χήρο ποντίκι πεδίου που επιδιώκει βοήθεια από τους αρουραίους για να μετακινήσει το σπίτι της.
* Jeremy: Ο γιος της κ. Brisby, ο οποίος είναι σοβαρά άρρωστος.
* Justin: Ο άλλος γιος της κυρίας Brisby.
* Timothy: Ο εγγονός του Νικόδημου, ο οποίος είναι αρκετά ντροπαλός και συχνά μπαίνει σε πρόβλημα.
Σημείωση: Ενώ η "κυρία Frisby και οι αρουραίοι του NIMH" είναι ένα κλασικό παιδικό βιβλίο, δεν υπάρχει καμία αναφορά σε κανέναν αρουραίους που ονομάζονται "NIMH" στο βιβλίο. Το "NIMH" αναφέρεται στο Εθνικό Ινστιτούτο Ψυχικής Υγείας, όπου οι αρουραίοι της ιστορίας είχαν πειραματιστεί.