1. Πολυπλοκότητα δείγματος :Η υγρή χρωματογραφία είναι γενικά λιγότερο αποτελεσματική για τον διαχωρισμό σύνθετων δειγμάτων με μεγάλο αριθμό συστατικών. Αυτό συμβαίνει επειδή όσο περισσότερα συστατικά υπάρχουν στο δείγμα, τόσο πιο δύσκολο γίνεται να επιτευχθεί καλός διαχωρισμός και ανάλυση.
2. Δείγμα εφέ μήτρας :Η μήτρα του δείγματος μπορεί επίσης να επηρεάσει τον χρωματογραφικό διαχωρισμό. Για παράδειγμα, εάν το δείγμα περιέχει υψηλά επίπεδα αλάτων ή άλλων μη πτητικές ενώσεις, αυτές μπορούν να ανταγωνιστούν τις αναλυόμενες ουσίες για τη σύνδεση στη στατική φάση, οδηγώντας σε κακό διαχωρισμό.
3. Υπερφόρτωση στηλών :Εάν εγχυθεί πάρα πολύ δείγμα στη στήλη, μπορεί να υπερφορτώσει τη στατική φάση και να οδηγήσει σε κακό διαχωρισμό. Αυτό συμβαίνει επειδή τα μόρια του δείγματος θα ανταγωνίζονται για θέσεις δέσμευσης στη στατική φάση, οδηγώντας σε διεύρυνση κορυφής και μειωμένη ανάλυση.
4. Σύνθεση κινητής φάσης :Η σύνθεση της κινητής φάσης μπορεί επίσης να επηρεάσει την αποτελεσματικότητα της υγρής χρωματογραφίας. Για παράδειγμα, εάν η κινητή φάση είναι πολύ πολική, μπορεί να οδηγήσει σε κακή κατακράτηση αναλυτών στη στατική φάση, ενώ εάν η κινητή φάση είναι πολύ μη πολική, μπορεί να οδηγήσει σε κακό διαχωρισμό των αναλυτών.
5. Θερμοκρασία :Η θερμοκρασία μπορεί επίσης να επηρεάσει την αποτελεσματικότητα της υγρής χρωματογραφίας. Για παράδειγμα, εάν η θερμοκρασία είναι πολύ υψηλή, μπορεί να οδηγήσει σε αυξημένη διεύρυνση της ζώνης και μειωμένη ανάλυση, ενώ εάν η θερμοκρασία είναι πολύ χαμηλή, μπορεί να οδηγήσει σε κακό σχήμα κορυφής και μειωμένη ευαισθησία.
6. Όργανα :Η ποιότητα των οργάνων που χρησιμοποιούνται για την υγρή χρωματογραφία μπορεί επίσης να επηρεάσει την αποτελεσματικότητά της. Για παράδειγμα, εάν η αντλία δεν είναι σε θέση να παρέχει σταθερό ρυθμό ροής, μπορεί να οδηγήσει σε κακό διαχωρισμό και μειωμένη αναπαραγωγιμότητα. Ομοίως, εάν ο ανιχνευτής δεν είναι αρκετά ευαίσθητος, μπορεί να μην είναι σε θέση να ανιχνεύσει χαμηλά επίπεδα αναλυτών.
Με την κατανόηση και την αντιμετώπιση αυτών των πιθανών περιορισμών, είναι δυνατό να βελτιστοποιηθούν οι υγρές χρωματογραφικές τεχνικές για μέγιστη αποτελεσματικότητα.