Η καταλάση είναι ένα ένζυμο που βρίσκεται σε φυτά και άλλους οργανισμούς που καταλύουν την αποσύνθεση του υπεροξειδίου του υδρογόνου (H2O2) σε νερό και οξυγόνο. Η δραστικότητα της καταλάσης μπορεί να μετρηθεί στα φύλλα των φυτών παρακολουθώντας τον ρυθμό παραγωγής οξυγόνου.
Υλικά:
* Φρέσκα φύλλα φυτών
* Διάλυμα υπεροξειδίου υδρογόνου (H2O2) (3%)
* Σωλήνες δοκιμών γυαλιού
* Stoppers
* Αποφοίτησε κύλινδρος
* Χρονόμετρο
* Γυαλιά ασφαλείας
Διαδικασία:
1 Συλλέξτε αρκετά φρέσκα φύλλα φυτών.
2. Κόψτε τα φύλλα σε μικρά κομμάτια χρησιμοποιώντας ένα αιχμηρό μαχαίρι ή ψαλίδι.
3. Τοποθετήστε 5 g ιστού φύλλων σε ένα γυάλινο δοκιμαστικό σωλήνα.
4. Προσθέστε 10 ml διαλύματος υπεροξειδίου 3% υδρογόνου στον δοκιμαστικό σωλήνα.
5. Γρήγορα πίστες τον δοκιμαστικό σωλήνα και ξεκινήστε το χρονόμετρο.
6. Παρατηρήστε το χρονικό διάστημα που χρειάζεται για τον ιστό των φύλλων να παράγει αρκετό οξυγόνο για να γεμίσει πλήρως τον δοκιμαστικό σωλήνα.
7. Καταγράψτε το χρόνο σε δευτερόλεπτα.
Υπολογισμοί:
Η δραστικότητα καταλάσης του ιστού των φύλλων μπορεί να υπολογιστεί χρησιμοποιώντας τον ακόλουθο τύπο:
Δραστηριότητα καταλάσης =(όγκος οξυγόνου που παράγεται σε ML)/(χρόνος σε δευτερόλεπτα)
Παράδειγμα:
Εάν ο ιστός των φύλλων παράγει 10 mL οξυγόνου σε 30 δευτερόλεπτα, τότε η δραστικότητα της καταλάσης θα ήταν:
Δραστηριότητα καταλάσης =(10 mL)/(30 s) =0,33 ml/s
ερμηνεία:
Η δραστηριότητα της καταλάσης των φυτικών φύλλων μπορεί να ποικίλει ανάλογα με το είδος του φυτού, την ηλικία των φύλλων και τις περιβαλλοντικές συνθήκες. Γενικά, η υψηλότερη δραστικότητα καταλάσης σχετίζεται με μεγαλύτερη αντίσταση στο οξειδωτικό στρες.
Προφυλάξεις ασφαλείας:
* Φορέστε γυαλιά ασφαλείας για να προστατεύσετε τα μάτια σας.
* Το υπεροξείδιο του υδρογόνου είναι μια διαβρωτική ουσία. Χειριστείτε με φροντίδα και αποφύγετε την επαφή με το δέρμα και τα ρούχα σας.
* Εάν το υπεροξείδιο του υδρογόνου έρχεται σε επαφή με το δέρμα ή τα μάτια σας, ξεπλύνετε αμέσως με νερό.